Test d'activité de l'hexokinase

Test d'activité de l'hexokinase

Le test de l'activité de l'hexokinase est une technique biochimique cruciale utilisée pour mesurer l'activité de l'hexokinase, une enzyme qui catalyse la phosphorylation du glucose en glucose-6-phosphate, une étape clé de la glycolyse.

Ce test utilise généralement une réaction enzymatique couplée impliquant la glucose-6-phosphate déshydrogénase (G6PDH) et le coenzyme NAD+. Le processus commence par la conversion du glucose en glucose-6-phosphate par l'hexokinase, ce qui entraîne simultanément la conversion de l'ATP en ADP. Le glucose-6-phosphate produit est ensuite oxydé par la G6PDH, entraînant la réduction du NAD+ en NADH. L'augmentation du NADH peut être mesurée quantitativement par spectrophotométrie à 340 nm, fournissant ainsi une évaluation directe de l'activité de l'hexokinase.

Ce dosage est sensible et peut être réalisé sur différents types d'échantillons, tels que les homogénats de tissus et les extraits cellulaires, ce qui le rend précieux à la fois pour les diagnostics cliniques et les applications de recherche. Il est particulièrement utile dans les études liées aux maladies métaboliques, au métabolisme du cancer et aux effets des produits pharmaceutiques sur les voies glycolytiques. En mesurant l'activité de l'hexokinase, les chercheurs peuvent obtenir des informations sur le métabolisme énergétique cellulaire et les mécanismes de régulation qui gouvernent la glycolyse, contribuant ainsi à une meilleure compréhension des troubles métaboliques et des cibles thérapeutiques potentielles.

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