Le test de l'activité de la NAD kinase est une technique biochimique essentielle utilisée pour mesurer l'activité de la NAD kinase, une enzyme responsable de la phosphorylation du NAD+ pour produire du NADP+. Cette conversion est cruciale pour maintenir l'équilibre du pool NAD/NADP+, qui joue un rôle important dans divers processus métaboliques, tels que la respiration cellulaire, la synthèse des lipides et la régulation du stress oxydatif.

Le test implique généralement l'incubation d'un mélange réactionnel contenant du NAD+, de l'ATP et la source enzymatique dans des conditions contrôlées. Après incubation, la réaction est arrêtée, et le NADP+ produit peut être quantifié à l'aide de méthodes spectrophotométriques ou par chromatographie liquide à haute performance (HPLC).

Une approche courante pour ce dosage consiste à coupler la réaction avec la glucose-6-phosphate déshydrogénase (G6PDH), où la production de NADP+ entraîne la réduction du NAD+ en NADH. L'augmentation du NADH peut être mesurée à 340 nm, fournissant ainsi une évaluation directe de l'activité de la NAD kinase. Ce dosage est particulièrement utile dans la recherche axée sur la régulation métabolique, la biologie du cancer et l'étude des effets de divers composés sur le métabolisme cellulaire.

De plus, comprendre l'activité de la NAD kinase a des implications pour les stratégies thérapeutiques visant les troubles métaboliques et les maladies liées au vieillissement, en faisant un outil essentiel à la fois dans la recherche fondamentale et appliquée.